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茯砖茶中“金花”菌产蛋白酶特性的研究
【英文篇名】CHARACTERIZATIONOFPROTEASEPRODUCEDBY"JINHUA"FUNGIFROMFUZHUANBRICKTEA
【作者中文名】丁婷;吕嘉枥;侯蓓;
【作者英文名】DINGTing;LVJia-li;HOUBei（SchoolofLifeScienceandEngineering;ShaanxiUniversityofScienceXian710021;China）;
【作者单位】陕西科技大学生命科学与工程学院;
【文献出处】陕西科技大学学报(自然科学版),JournalofShaanxiUniversityofScience“金花”菌;蛋白酶;
【英文关键词】FuzhuanBrickTea;"Jinhua"fungi;protease;
在不同培养时间段对"金花"菌产酸、中、碱性蛋白酶酶活进行测定,研究了不同碳源、氮源、无机盐等培养条件对产中性及碱性蛋白酶酶活的影响.结果表明:"金花"菌所产蛋白酶以中性和碱性蛋白酶为主,最适碳源为乳糖,氮源为麸皮,最适无机盐为氯化钠.在此条件下"金花"菌产中性蛋白酶的酶活可达到237U/g,产碱性蛋白酶的酶活可达236U/g."金花"菌对茯砖茶的消化作用有促进作用.
【英文摘要】Ｔｈｅ ａｃｉｄ ｐｒｏｔｅａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ，ｎｅｕｔｒａｌ ｐｒｏｔｅａｓｅ ａｎｄ ａｌｋａｌｉｎｅ ｐｒｏｔｅａｓｅ ｗｈｉｃｈ ｐｒｏｄｕｃｅｄｂｙ“Ｊｉｎｈｕａ”ｆｕｎｇｉ ｗａｓ ｍｅａｓｕｒｅｄ ａｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｃｕｌｔｕｒａｌ ｔｉｍｅ．Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ａｄｄｉｔｉｏｎ ｏｆ ｃａｒｂｏｎｓｏｕｒｃｅｓ，ｎｉｔｒｏｇｅｎ ｓｏｕｒｃｅｓ ａｎｄ ｉｎｏｒｇａｎｉｃ ｓａｌｔｓ ｏｎ ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ ｎｅｕｔｒａｌ ａｎｄ ａｌｋａｌｉｎｅ ｐｒｏｔｅａｓｅ ｗａｓｓｔｕｄｉｅｄ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｍａｎｙ ｐｒｏｄｕｃｅｄ ｐｒｏｔｅａｓｅ ｏｆ“Ｊｉｎｈｕａ”ｆｕｎｇｉ ｗａｓ ｎｅｕｔｒａｌｐｒｏｔｅａｓｅ ａｎｄ ａｌｋａｌｉｎｅ ｐｒｏｔｅａｓｅ．Ｃａｒｂｏｎ ｓｏｕｒｃｅ ａｎｄ ｎｉｔｒｏｇｅｎ ｓｏｕｒｃｅ ｐｒｅｆｅｒｒｅｄ ｆｏｒ ｐｒｏｔｅａｓｅ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｗｅｒｅ ｌａｃｔｏｓｅ ａｎｄ ｂｒａｎ，ｗｈｉｌｅ ｉｎｏｒｇａｎｉｃ ｓａｌｔｓ ｐｒｅｆｅｒｒｅｄ ｗｅｒｅ ｓｏｄｉｕｍ ｃｈｌｏｒｉｄｅ．Ｕｎｄｅｒｔｈｅｓｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ，ｔｈｅ ｎｅｕｔｒａｌ ｐｒｏｔｅａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｗａｓ ２３７Ｕ／ｇ ａｎｄ ｔｈｅ ａｌｋａｌｉｎｅ ｐｒｏｔｅａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙｗａｓ ２３６Ｕ／ｇ．
０ 引 言
茯砖茶，主销西北少数民族地区，能“消腥肉之腻，解青稞之热”．关于茯砖茶利于消化的研究已有报道［１－４］．“金花菌”是茯砖茶的优势菌，在茯砖茶上长有大量金黄色颗粒，俗称“金花”．而茯砖茶这一功能与生长在其表面的“金花”菌密不可分［５，６］．本文通过研究“金花”菌产蛋白酶酶活，证明“金花”菌对促进人体消化功能有一定的作用，为进一步研究“金花”菌在调理人体消化功能提供理论基础．
１ 材料与方法
１．１ 菌种
从陕西苍山茶叶有限公司提供的茯砖茶表面分离纯化得到的菌种．
１．２ 材料
１．２．１ 主要设备与试剂
设备：电子天平，分析天平，高压蒸汽灭菌锅，恒温干燥箱，超净工作台，电热恒温培养箱，恒温水浴锅，紫外可见分光光度计，高速冷冻离心机．
试剂：Ｆｏｌｉｎ－酚试剂、三氯乙酸、碳酸钠、乳酸（８０％～９０％）、乳酸钠、干酪素等，干酪素为化学纯外，其余均为分析纯．
１．２．２ 培养基
斜面培养基：蒸馏水１ ０００ｍＬ，ｐＨ自然．
基础培养基：在２５０ｍＬ的三角瓶中加入１０ｇ麸皮及１０ｍＬ水拌匀，１２１℃高温蒸汽灭菌３０ｍｉｎ，趁热摇散，冷却后接种１ｍＬ“金花”菌悬浮液．
１．３ 方法
１．３．１ 酪氨酸标准曲线
１．３．２ 粗酶液的提取
２ 结果与分析
２．１ 酪氨酸标准曲线
２．２ 菌的生长及产酶动态
２．３ 固态发酵培养基的优化
２．３．１ 最适碳源的选择
２．３．３ 最适无机盐的选择
３ 结束语
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