【www.cy260.com - 黑茶价格】
黑茶紧压茶浸提物对胰蛋白酶活性的影响陈文峰屠幼英吴媛媛梁慧玲王漪
(浙江大学茶学系,310029)(山东省青岛市果茶工作站,266071)
黑茶紧压茶是我国少数民族地区的一种后发酵茶,是那些以高蛋白食品为主食地区的人民必不可少的饮料。黑茶紧压茶与绿茶的加工工艺区别主要在于前者经微生物发酵,而后者则未经此工艺,因此两者的生理活性物质有很大的差别。已有大量的研究证实,在对用酵母菌发酵含有大量酚性化合物的葡萄酒和红茶菌中发现,二者均含有多种有机酸,并且有益于提高人体肠胃道功能,但迄今为止未见有黑茶紧压茶有机酸的组成和生理功能的研究报道。
本实验拟在研究黑茶紧压茶与绿茶间有机酸等生理活性成分及对蛋白酶激活作用的差异,以便为研究少数民族地区饮茶习惯与人体代谢机能的相关性提供一定的理论依据。
一、材料与方法
(一)材料
11原料
供试原料为市售的云南紧压茶、奉化紧压茶、湖北青砖茶、泰顺三杯香,胰蛋白酶由杭州三叶生化药厂提供,干酪素购自中国医药上海化学试剂公司,蛋白质含量为90125%。有机酸标准样包括草酸、苹果
酸、醋酸、柠檬酸、琥珀酸标准样,茶多酚标样包括GC、EGC、C、EC、EGCG、GCG、ECG、CG标准样,以上标准样均为Sigma公司产品。
21材料处理
(1)砖茶浸提根据《茶叶实验技术》中紧压茶浸提方法。
(2)绿茶浸提根据《茶叶实验技术》中绿茶浸提方法。
(二)分析方法
11茶汤中有机酸与儿茶素的液相色谱分析分别取配制好的4个样品茶汤5mL,经BECK2MAN,JZ-H5离心,转速为12000r/min,离心后,用岛津SCL-10AHPLC液相色谱分析。儿茶素色谱分析
条件:流动相为215%、pH值215的NH4H2PO4,检测波长为220nm,灵敏度为0101,指数为2,流量为110mL/min。有机酸色谱分析条件:流动相为215%、pH值215的NH4H2PO4,检测波长为220nm,灵敏度为01001,指数为2,流量为018mL/min。
21茶样中其他有效成分测定
茶多酚总量测定采用酒石酸铁比色法,氨基酸的测定采用茚三酮比色法,儿茶素单体、有机酸含量、咖啡碱含量、Vc含量用HPLC检测,pH值测定采用日本荣盛堂生产的手持pH计。
31蛋白酶活力测定
(1)蛋白酶液配制
称取胰蛋白酶试样01994g,定容至50mL,从中取出15mL,稀释至25mL,再从25mL中吸取1mL,用CaCl2定容至100mL。准确吸取上述酶液2mL,置10mL容量瓶中,用预冷至5℃以下的硼酸缓冲液定容,均匀备用。
(2)酪蛋白配制
称取115025g干酪素,加011mol/LNaOH13mL、水40mL,置60℃水浴加热至溶解,放至室温后加水稀释成100mL,并调至pH810。
(3)酶活力测定
取试管7组,每组3只,均准确加入蛋白酶液1mL及硼酸缓冲液2mL,置40℃水浴保温10min,在1～6组试管中加入预热至40℃的酪蛋白液5mL,并分别加入015mL云南紧压茶茶汁、015mL奉化紧压茶茶汁、015mL湖北青砖茶茶汁、015mL泰顺三杯香茶汁、015mL混合有机酸液和015mL茶多酚液,酪蛋白液与各处理试液同时加入;第7组只加预热至40℃的酪蛋白液5mL作为对照。将处理和对照置于40℃±015℃的水浴中准确反应30min后,加5%的三氯乙酸510mL终止反应,摇匀静置,过滤,收集滤液。将5mL5%三氯乙酸和8mL硼酸缓冲液混合作为空白调零。在275nm波长处分别测定上述各管滤液的光吸收值。
二、结果
(一)供试茶样中主要成分含量的测定结果
从表1可以看出,4个茶样中以三杯香的茶多酚含量最高,云南紧压茶次之。与其他砖茶样相比,三杯香中茶多酚含量之高优势极为明显,其茶多酚含量是砖茶中茶多酚含量最低的湖北青砖茶的10158倍。从氨基酸、Vc含量测定结果中,也发现三杯香的相应含量均要高出3个砖茶样。3个砖茶样的有机酸含量均高于绿茶,其中以云南紧压茶的有机酸含量最高,奉化紧压茶次之,其有机酸含量分别为绿茶有机酸含量的3155倍和3120倍。
(二)各处理酶活力测定结果
从表2酶活力的测定结果中可以看出,在加了茶汁、有机酸或茶多酚后,酶活力比对照提高了很多倍,比较后可得:处理1>处理4>处理6>处理2>处理3>处理5>对照。处理1酶活力达到对照样的
1517倍,酶活力最低的有机酸处理其酶活力也为对照的116倍。
本试验还进行了蛋白酶活力与茶多酚、酸性物质含量的相关性分析,结果表明,茶多酚含量与蛋白酶活力相关系数为019373,酸性物质含量与蛋白酶活力相关系数为01489。从而得出,茶叶中最主要的成分———茶多酚对蛋白酶活力影响极大,随着其含量的增加能有效地提高酶活力,有机酸、氨基酸、Vc等酸性物质对蛋白酶活力也有影响,但作用不及茶多酚明显。
三、讨论分析
在有机酸和茶多酚对酶活力影响试验中发现,后者的作用明显强于前者,这可能是由于茶多酚的羟基与酶蛋白的某些羟基或羧基结合后形成了大分子的空间结构,使酶活性中心暴露,易与底物结合,从而提高了酶的催化活性。但总体上可以看出,茶多酚和有机酸存在着协同作用,酶活力处理1>处理4>处理6。从该试验结果可以看出,紧压茶中微生物的糖代谢和三羧酸循环中产生的有机酸含量显著增加,氨基酸含量和维生素C含量下降明显,促成微生物在发酵过程中充分利用这些碳源和氮源进行繁衍。云南紧压茶和绿茶中均含有大量的茶多酚和有机酸,由于二者都能提供质子,从而改变了酶反应环境的pH值。人体蛋白的分解多在胃和小肠中进行,小肠和胃中的蛋白酶可由胰蛋白酶激活它们的酶原而释放出有活性的蛋白酶,因此在摄入含有较高浓度的紧压茶汁后,通过提高胰蛋白酶活性,同时激活小肠和胃的蛋白酶,加快食物的分解和吸收。已有的研究也表明,有机酸与茶多酚结合后可帮助茶多酚进入细胞膜,从而加大在体液中茶多酚的浓度,以提高胰蛋白酶活性。
品，细品，茶叶网cy260.com的优秀编辑为您独家提供优质茶叶知识相关文章，《黑茶紧压茶浸提物对胰蛋白酶活性的影响》一文将帮助你了解茶叶知识相关方面的知识，如果还想进一步了解关于2022茶叶知识方面知识请访问黑茶价格专题。
